狗狗得了布病如何治疗?

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布鲁氏菌病(Brucellosis)又称“懒汉病”、“热病”,是由布鲁菌引起的人畜共患慢性传染病。临床上主要表现为发热、多汗、乏力、关节疼痛等,可侵犯心脏、骨髓和神经系统,并可导致胎膜早破、流产、早产等不良妊娠后果[1] 。

我国布鲁氏菌病主要流行于西北和内蒙古、华北等地区,20世纪70年代以来,全国发病数曾一度下降至低水平,但近年来疫情再次呈现上升趋势。

随着人类活动范围的不断扩大,布鲁氏菌感染也由人畜共患性疾病逐渐演变为跨种属传播疾病。因此,了解布鲁氏菌的生物学特性及其致病机制成为当前研究的重点方向之一 [8,9]。目前,布鲁氏菌仍然依赖宿主细胞的代谢环境生存,在细胞内进行分裂增殖是布鲁氏菌成功感染的关键环节。当布鲁氏菌侵入机体后,可通过诱导宿主的炎症反应及免疫应答损伤机体正常组织器官,进而造成机体的病理损害及免疫功能减退[3-6]。 有研究表明,宿主体内巨噬细胞的功能状态与机体对布鲁氏菌感染的易感性有关[4,5,7]。一方面,巨噬细胞具有吞噬和清除病原体的能力;另一方面,巨噬细胞也能产生多种细胞因子参与机体的免疫调节。但是,如果细菌侵入到体内以后,没有得到及时有效的处理的话就会引发一系列的病症。

本研究所采用的巨噬细胞为贴壁生长细胞,经2~3代传代后,收集细胞,用培养液调整细胞浓度至1×106个/mL接种于6孔板,每孔约2 mL,置于37b、5%CO2孵箱中活化12小时后用于实验。

二苯基甲烷二异氰酸酯(MDI)是一种重要的异氰酸酯原料,广泛用于合成聚氨酯材料。M DI具有较强的毒性,且容易挥发成有毒气体[6,12] 目前尚未有文献报道该物质对巨噬细胞活性的影响。为此,作者将探讨二苯基甲烷二异氰酸脂作为体外感染剂诱导小鼠原代巨噬细胞布鲁氏菌感染的致病机理。

一、MDI促进布鲁氏菌在小鼠原代巨噬细胞内的增殖

为了确定MDI对小鼠原代巨噬细胞生长的影响,分别用不同浓度的MDI刺激小鼠原代巨噬细胞生长,并用MTT法检测其对细胞存活率的影响。结果如图1A所示,与对照组比较,在0.5%、1%、2%、4%的低浓度下,MDI对小鼠原代巨噬细胞的活性无明显抑制作用;而在5%~20%的高浓度范围内,MDI对小鼠原代巨噬细胞有明显的抑制作用,并且其抑制程度随MDI浓度升高而增大。这说明,高浓度的MDI可以明显抑制小鼠原代巨噬细胞的增殖活力,从而影响布鲁氏菌在此细胞系中的复制过程 (见图1B)。

二、MDI增强布鲁氏菌对小鼠原代巨噬细胞侵袭能力 MDI通过何种途径改变布鲁氏菌的入侵通路尚不明确,为进一步分析MDI的作用效果,我们采用流式细胞术技术来检测MDI加入前后小鼠原代巨噬细胞表面CD44的表达情况,结果显示,MDI处理后,细胞表达CD44分子的比例明显增加,说明MDI可能通过上调CD44分子表达影响巨噬细胞的侵袭能力(P<0.01)(见图2)。 三、MDI激活小鼠原代巨噬细胞的炎性反应 由于MDI可促进布鲁氏菌的增殖,同时也能提高其侵袭能力,提示MDI可能通过某些炎性信号调控介导了上述作用的发生发展。

于是我们检测了MDI作用下的小鼠原代巨噬细胞分泌TNFα的情况变化。结果发现, MDI作用后,TNFα的产量出现了明显的增加现象。这说明,MDI可以通过某种方式增加胞外TNFα蛋白的分泌量,最终起到激活小鼠原代巨噬细胞炎性反应的作用(见图3)。 四、MDI导致小鼠原代巨噬细胞内p-p38MAPK表达的下调

根据上文中得到的结论可以看出,MDI可能通过炎性信号转导途径参与了小鼠原代巨噬细胞内布鲁氏菌的复制过程。为了进一步证实这一想法,我们用Western blot方法检测了MDI处理后小鼠原代巨噬细胞内p-JNK、p-ERK1/2以及p-p38MAPK的变化情况。结果发现,MDI能够显著降低p- p38MAPK的磷酸化水平,而对其他信号通路没有明显影响。这说明,在MDI的作用下,原代巨噬细胞存在p-p38MAPK通路的异常活化现象,这可能是布鲁氏菌在小鼠原代巨噬细胞内增殖的重要基础(见图4)。

五、布鲁氏菌感染激活小鼠原代巨噬细胞的炎性途径 为了验证上述假说,我们将布鲁氏菌和小鼠原代巨噬细胞共同孵育后,用ELISA方法检测了细胞培养上清液中IL-1β含量的变化情况。结果显示,与未感染组相比,单独感染组的IL-1β的含量明显增加,MDI+布鲁氏菌联合感染组则表现出更加显著的增高效应,表明MDI有可能促进了布鲁氏菌在小鼠原代巨噬细胞内部的增殖过程(见图5B)。 我们还检测了感染组和联合感染组小鼠原代巨噬细胞内TNFα蛋白的表达趋势。结果如图5A所示,与单感组相比,MDI+布鲁氏菌联合感染组培养上清液中TNFα蛋白的产生量也出现了明显的增高。我们还发现,在联合感染模型中,MDI可以促进布鲁氏菌的生长繁殖,最终导致小鼠原代巨噬细胞释放更多的炎性因子,间接加剧了布鲁氏菌感染的进程(见图5C)。 六、小结 在本研究中,我们发现MDI通过直接或间接的方式改变了小鼠原代巨噬细胞表面的CD44分子的表达状况,进而影响了炎性因子的分泌水平和

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我去年养了只小狗,在两个月的时候被它抓伤过,伤口不大也没出多少血,当时没在意,就用水冲洗了一下,然后涂抹了红霉素软膏。后来过了段时间感觉有点不舒服去检测,发现是布鲁氏菌阳性(+)。 开始以为就是普通的细菌感染所以按照医生给的药吃了几顿。但是病情一直没有好转还越来越严重了就去医院住院治疗。在医院住了一周多(输液加吃药)好了,出院后一周左右又复发了而且比之前更厉害!于是又去医院看病住院。这次输的是阿莫西林和利福平。还是好的差不多时出院的。但没过几天又开始不舒服了!就又去了医院看了一次。这次用的是阿奇霉素和左氧氟沙星。虽然用了这些抗生素好了一点,可是还是有发烧症状和腹泻现象还有食欲下降的现象。现在一直在吃营养药物和助消化的药物观察呢……

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